核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)

背(bei)景(jing)知(zhi)識(zhi)

由(you)於(yu)核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)步(bu)驟(zhou)較(jiao)多(duo)，且(qie)多(duo)個(ge)環(huan)節(jie)樣(yang)本(ben)直(zhi)接(jie)暴(bao)露(lou)於(yu)空(kong)氣(qi)中(zhong)，任(ren)何(he)一(yi)個(ge)環(huan)節(jie) 出(chu)現(xian)一(yi)點(dian)小(xiao)紕(pi)漏(lou)就(jiu)容(rong)易(yi)導(dao)致(zhi)整(zheng)個(ge)實(shi)驗(yan)室(shi)的(di)汙(wu)染(ran)。即(ji)使(shi)嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)規(gui)程(cheng)操(cao)作(zuo)，核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)依(yi)然(ran)無(wu)法(fa)徹(che)底(di)避(bi)免(wen)。

核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)主(zhu)要(yao)體(ti)現(xian)在(zai)樣(yang)本(ben)核(he)酸(suan)或(huo)擴(kuo)增(zeng)產(chan)物(wu)在(zai)台(tai)麵(mian)、設(she)備(bei)、檢(jian)測(ce)人(ren)員(yuan)表(biao)麵(mian)的(di)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)，以(yi)及(ji)擴(kuo) 增(zeng)產(chan)物(wu)形(xing)成(cheng)的(di)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)。氣(qi)溶(rong)膠(jiao)由(you)於(yu)顆(ke)粒(li)較(jiao)小(xiao)，若(ruo)不(bu)做(zuo)處(chu)理(li)可(ke)長(zhang)期(qi)漂(piao)浮(fu)在(zai)空(kong)氣(qi)中(zhong)持(chi)續(xu)影(ying)響(xiang)實(shi)驗(yan)室(shi)的(di)檢(jian)測(ce)。針(zhen)對(dui)固(gu)體(ti)表(biao)麵(mian)的(di)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)，很(hen)多(duo)實(shi)驗(yan)室(shi)采(cai)用(yong)75%乙(zhe)醇(chun)或(huo)84 消(xiao)毒(du)液(ye)進(jin)行(hang)擦(ca)拭(shi)處(chu)理(li)。針(zhen)對(dui)空(kong)氣(qi)中(zhong)的(di)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)，很(hen)多(duo)實(shi)驗(yan)室(shi)選(xuan)擇(ze)乙(zhe)醇(chun)噴(pen)霧(wu)使(shi)核(he)酸(suan)沉(chen)降(xiang)然(ran)後(hou)配(pei)合(ge)84消(xiao)毒(du)液(ye)處(chu)理(li)地(de)麵(mian)及(ji)台(tai)麵(mian)，但(dan)效(xiao)果(guo)不(bu)是(shi)太(tai)理(li)想(xiang)。因(yin)此(ci)迫(po)切(qie)需(xu)要(yao)研(yan)發(fa)一(yi)種(zhong)能(neng)夠(gou)快(kuai)速(su)將(qiang)核(he)酸(suan)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)沉(chen)降(xiang)的(di)物(wu)質(zhi)，將(qiang)懸(xuan)浮(fu)在(zai)空(kong)氣(qi)中(zhong)的(di)核(he)酸(suan)進(jin)行(hang)沉(chen)降(xiang)，然(ran)後(hou)配(pei)合(ge)84消(xiao)毒(du)液(ye)處(chu)理(li)地(de)麵(mian)及(ji)台(tai)麵(mian)。

原(yuan)理(li)

采(cai)用(yong)大(dai)分(fen)子(zi)吸(xi)附(fu)絡(lao)合(ge)原(yuan)理(li)吸(xi)附(fu)空(kong)氣(qi)中(zhong)的(di)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)，形(xing)成(cheng)不(bu)溶(rong)物(wu)，並(bing)配(pei)合(ge)酶(mei)水(shui)解(xie)核(he)酸(suan)片(pian)段(duan)，可(ke)有(you)效(xiao)的(di)將(qiang)存(cun)在(zai)與(yu)液(ye)體(ti)、空(kong)氣(qi)、物(wu)表(biao)上(shang)的(di)核(he)酸(suan)去(qu)除(chu)幹(gan)淨(jing)。

效(xiao)果(guo)評(ping)價(jia)

1) 84 消(xiao)毒(du)液(ye)和(hu)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)可(ke)有(you)效(xiao)清(qing)除(chu)溶(rong)液(ye)中(zhong)核(he)酸(suan)

為(wei)驗(yan)證(zheng)不(bu)同(tong)試(shi)劑(ji)對(dui)於(yu)溶(rong)液(ye)中(zhong)核(he)酸(suan)的(di)清(qing)除(chu)效(xiao)果(guo)，將(qiang)5種(zhong)不(bu)同(tong)試(shi)劑(ji)分(fen)別(bie)與(yu)RNA或(huo)DNA 溶(rong)液(ye)混(hun)合(ge)，瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)鑒(jian)定(ding)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)。結(jie)果(guo)顯(xian)示(shi)，84消(xiao)毒(du)液(ye)和(hu)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)能(neng)夠(gou)將(qiang)溶(rong)液(ye)中(zhong)的(di) RNA (圖(tu) 1A) 或(huo) DNA (圖(tu) 1B) 完(wan)全(quan)清(qing)除(chu)幹(gan)淨(jing)，DNA AWAY(ThermoFisher 公(gong)司(si)核(he)酸(suan)去(qu)除(chu)劑(ji)) 隻(zhi)能(neng)部(bu)分(fen)清(qing)除(chu)，洗(xi)滌(di)劑(ji)對(dui)於(yu)核(he)酸(suan)無(wu)影(ying)響(xiang)。另(ling)外(wai)，核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji) 處(chu)理(li)的(di)樣(yang)本(ben)電(dian)泳(yong)時(shi)在(zai)點(dian)樣(yang)孔(kong)中(zhong)可(ke)見(xian)核(he)酸(suan)條(tiao)帶(dai)，離(li)心(xin)處(chu)理(li)後(hou)核(he)酸(suan)條(tiao)帶(dai)消(xiao)失(shi)。提(ti)示(shi)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)與(yu)溶(rong)液(ye)中(zhong)的(di)核(he)酸(suan)形(xing)成(cheng)了(liao)不(bu)溶(rong)物(wu)，與(yu)該(gai)產(chan)品(pin)的(di)核(he)酸(suan)清(qing)除(chu)原(yuan)理(li)符(fu)合(ge)。84消(xiao)毒(du)液(ye)處(chu)理(li)的(di)樣(yang)本(ben)不(bu)管(guan)離(li)心(xin)與(yu)否(pi)均(jun)未(wei)見(xian)到(dao)核(he)酸(suan)條(tiao)帶(dai)，提(ti)示(shi)溶(rong)液(ye)中(zhong)核(he)酸(suan)已(yi)降(xiang)解(xie)。

圖(tu) 1 瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)電(dian)泳(yong)鑒(jian)定(ding)不(bu)同(tong)試(shi)劑(ji)對(dui)溶(rong)液(ye)中(zhong)RNA和(hu)DNA的(di)清(qing)除(chu)效(xiao)果(guo)

2）84消(xiao)毒(du)液(ye)和(hu)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)可(ke)清(qing)除(chu)固(gu)體(ti)表(biao)麵(mian)核(he)酸(suan)

為(wei)驗(yan)證(zheng)不(bu)同(tong)試(shi)劑(ji)對(dui)於(yu)塑(su)料(liao)、玻(bo)璃(li)和(hu)金(jin)屬(zhu)表(biao)麵(mian)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)的(di)清(qing)除(chu)效(xiao)果(guo)，將(qiang)陽(yang)性(xing)PCR產(chan)物(wu)滴(di)在(zai)不(bu)同(tong) 材(cai)質(zhi)上(shang)晾(liang)幹(gan)模(mu)擬(ni)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)，分(fen)別(bie)用(yong) 5 種(zhong)不(bu)同(tong)試(shi)劑(ji)對(dui)3種(zhong)材(cai)質(zhi)表(biao)麵(mian)的(di)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)進(jin)行(hang)去(qu)除(chu)操(cao)作(zuo)，然(ran)後(hou)采(cai)集(ji)處(chu)理(li)點(dian)的(di)殘(can)留(liu)核(he)酸(suan)進(jin)行(hang)熒(ying)光(guang)PCR 鑒(jian)定(ding)。結(jie)果(guo)顯(xian)示(shi)，84消(xiao)毒(du)液(ye)和(hu) 核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)能(neng)夠(gou)較(jiao)好(hao)地(de)清(qing)除(chu)掉(diao)不(bu)同(tong)材(cai)質(zhi)表(biao)麵(mian)的(di)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)，DNA AWAY也(ye)對(dui)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)具(ju)有(you)一(yi)定(ding)清(qing)除(chu)效(xiao)果(guo)，但(dan)稍(shao)遜(xun)於(yu)前(qian)兩(liang)種(zhong)試(shi)劑(ji)，而(er)水(shui)和(hu)乙(zhe)醇(chun)結(jie)果(guo)相(xiang)似(shi)，均(jun)不(bu)能(neng)明(ming)顯(xian)去(qu)除(chu)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)，僅(jin)比(bi)對(dui)照(zhao)組(zu)Ct值(zhi)略(lüe)高(gao)。另(ling)外(wai)，金(jin)屬(zhu)表(biao)麵(mian)的(di)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)最(zui)容(rong)易(yi)被(bei)清(qing)除(chu)幹(gan)淨(jing)，玻(bo)璃(li)次(ci)之(zhi)，塑(su)料(liao)表(biao)麵(mian)的(di)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)最(zui)不(bu)易(yi)被(bei)清(qing)除(chu)幹(gan)淨(jing) (圖(tu)2)。提(ti)示(shi)塑(su)料(liao)材(cai)質(zhi)實(shi)驗(yan)台(tai)表(biao)麵(mian)的(di)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)要(yao)多(duo)次(ci)清(qing)理(li)才(cai)能(neng)達(da)到(dao)預(yu)期(qi)，可(ke)考(kao)慮(lv)將(qiang)兩(liang)種(zhong)試(shi)劑(ji)交(jiao)替(ti)使(shi)用(yong)以(yi)達(da)到(dao)最(zui)好(hao)的(di)處(chu)理(li)效(xiao)果(guo)，另(ling)外(wai)建(jian)議(yi)在(zai)金(jin)屬(zhu)台(tai)麵(mian)進(jin)行(hang)核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)相(xiang)關(guan)操(cao)作(zuo)。

圖(tu) 2 熒(ying)光(guang)PCR鑒(jian)定(ding)不(bu)同(tong)材(cai)質(zhi)表(biao)麵(mian)核(he)酸(suan)殘(can)留(liu)去(qu)除(chu)效(xiao)果(guo)

3）核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)配(pei)合(ge)84消(xiao)毒(du)液(ye)可(ke)清(qing)除(chu)模(mu)擬(ni)核(he)酸(suan)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)

實(shi)驗(yan)室(shi)的(di)核(he)酸(suan)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)極(ji)難(nan)清(qing)除(chu)幹(gan)淨(jing)，為(wei)了(liao)獲(huo)得(dei)一(yi)種(zhong)有(you)效(xiao)的(di)清(qing)除(chu)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)的(di)方(fang)案(an)，本(ben)研(yan)究(jiu)在(zai)密(mi)閉(bi)超(chao)淨(jing)工(gong)作(zuo)台(tai)內(nei)霧(wu)化(hua)陽(yang)性(xing) PCR 產(chan)品(pin)，模(mu)擬(ni)了(liao)核(he) 酸(suan)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)。然(ran)後(hou)分(fen)別(bie)測(ce)試(shi)了(liao)單(shan)獨(du)使(shi)用(yong)84消(xiao)毒(du)液(ye)或(huo)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)，以(yi)及(ji)75%乙(zhe)醇(chun)/84消(xiao)毒(du)液(ye)或(huo)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)/84消(xiao)毒(du)液(ye)的(di)複(fu)合(ge)處(chu)理(li)方(fang)案(an)。結(jie)果(guo)顯(xian)示(shi)，未(wei)處(chu)理(li)組(zu)熒(ying)光(guang)PCR Ct值(zhi)為(wei)27.21，說(shui)明(ming)密(mi)閉(bi)工(gong)作(zuo)台(tai)內(nei)模(mu)擬(ni)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)已(yi)經(jing)非(fei)常(chang)嚴(yan)重(chong)，超(chao)過(guo)了(liao)一(yi)般(pan)實(shi)驗(yan)室(shi)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)的(di)程(cheng)度(duo) (Ct 值(zhi)≥33)。單(shan)獨(du)使(shi)用(yong)84消(xiao)毒(du)液(ye)處(chu)理(li)一(yi)次(ci)，PCR Ct值(zhi)僅(jin)提(ti)高(gao)到(dao)29.72，提(ti)示(shi)其(qi)僅(jin)能(neng)部(bu)分(fen)去(qu)除(chu)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)；單(shan)獨(du)使(shi)用(yong)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)處(chu)理(li)一(yi)次(ci)能(neng)明(ming)顯(xian)去(qu)除(chu)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)，PCR Ct值(zhi)提(ti)高(gao)至(zhi)34.78，但(dan)仍(reng)有(you)微(wei)量(liang)殘(can)留(liu)；75%乙(zhe)醇(chun)/84消(xiao)毒(du)液(ye)複(fu)合(ge)方(fang)案(an)也(ye)能(neng)明(ming)顯(xian)地(de)除(chu)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)，PCR Ct值(zhi)提(ti)高(gao)至(zhi)32.86，還(huan)有(you)少(shao)量(liang)殘(can)留(liu)，且(qie)去(qu)除(chu)效(xiao)果(guo)略(lüe)遜(xun)於(yu)單(shan)獨(du)使(shi)用(yong)核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)；核(he)酸(suan)汙(wu)染(ran)去(qu)除(chu)劑(ji)/84消(xiao)毒(du)液(ye)複(fu)合(ge)方(fang)案(an)僅(jin)處(chu)理(li)一(yi)次(ci)就(jiu)完(wan)全(quan)將(qiang)超(chao)淨(jing)工(gong)作(zuo)台(tai)內(nei)的(di)高(gao) 濃(nong)度(duo)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)清(qing)除(chu)幹(gan)淨(jing)，提(ti)示(shi)該(gai)方(fang)案(an)可(ke)用(yong)於(yu)實(shi)驗(yan)室(shi)核(he)酸(suan)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)汙(wu)染(ran)的(di)清(qing)除(chu) (圖(tu) 3)。

圖(tu) 3 熒(ying)光(guang) PCR 鑒(jian)定(ding)不(bu)同(tong)策(ce)略(lüe)去(qu)除(chu)氣(qi)溶(rong)膠(jiao)的(di)效(xiao)果(guo)